The survival of three Arcobacter butzleri strains inside Acanthamoeba castellanii was assessed using axenic cultures of A. castellanii that were inoculated with the tested strains and incubated at 26 °C under aerobic conditions for 240 h. The behavior of bacteria in contact with amoebae was monitored using phase contrast microscopy. The bacterial survival rate within amoebae was assessed through counting colony forming units, using the gentamicin protection assay. All A. butzleri strains were able to survive during 240 h within the amoebae, thus suggesting that (i) A. butzleri resists the amoebic digestion processes at least for the analyzed time; (ii) that A. castellanii could serve as an environmental reservoir for this bacterium, probably acting as a transmission vehicle for A. butzleri.

Se determinó la sobrevida de 3 cepas de Arcobacter butzleri en el interior de trofozoítos de Acanthamoeba castellanii utilizando cultivos axénicos de la ameba, los que fueron inoculados con las cepas bacterianas e incubados a 26 °C en aerobiosis durante 240 h. La interacción bacterias/amebas fue monitorizada mediante microscopía de contraste de fase. Las tasas de sobrevida bacteriana en el interior de las amebas fueron establecidas a través del recuento de unidades formadoras de colonias mediante ensayos de protección con gentamicina. Todas las cepas de A. butzleri fueron capaces de sobrevivir en el interior de la ameba al menos durante 240 h, lo que sugiere, por un lado, que A. butzleri puede resistir los procesos de digestión propios de la ameba, al menos por el lapso aquí analizado y, por el otro, que A. castellanii podría actuar como reservorio ambiental de esta bacteria y, probablemente, como vehículo de transmisión de A. butzleri.

O objetivo deste trabalho foi identificar e quantificar as bactérias do sêmen fresco de ovino, avaliar o uso do higienizante Kilol-L® antes da coleta do sêmen e testar a sensibilidade das cepas bacterianas frente ao antibiograma. Foram selecionados 24 ovinos machos, clinicamente sadios, com idade média de quatro anos, da raça Santa Inês, agrupados em dois sistemas de criação: a pasto (n=12) e confinamento (n=12). Dos 120 ejaculados coletados, 99 tiveram crescimento bacteriano correspondendo a 82,5% das amostras. Os gêneros bacterianos isolados com maior frequência foram Staphylococcus spp., Bacillus spp., Streptococcus spp., Corynebacterium spp., Listeria spp.e Escherichia coli. Dos antibióticos testados, a amicacina e a gentamicina foram 100% eficazes para Bacillus spp. e E. coli. O ceftiofur foi efetivo para todas as bactérias isoladas, exceto Rodococcus equi. Streptococcus spp. foram sensíveis à ampicilina e eritromicina, Staphylococcus spp. foram sensíveis à gentamicina. O uso Kilol-L® reduziu o número de unidades formadoras de colônias (UFC/mL) do ejaculado sem prejudicar a sua qualidade. Dos antibióticos testados, ceftiofur e gentamicina foram os mais efetivos frente às cepas bacterianas isoladas. Dessa forma, a utilização desses antibióticos no meio diluidor do sêmen ovino é uma alternativa para controlar o crescimento bacteriano.

The objective of this study was to identify and quantify bacteria from fresh ram semen, evaluate the use of sanitizer Kilol-L® prior to semen collection, and test the sensitivity of bacterial strains against antibiotics. We selected 24 Santa Inês rams clinically healthy, at 4 years of aged, and grouped them into two systems: on pasture (n=12) and confined (n=12). The microbiological results indicated that of the total of 120 ejaculates, 99 had bacterial growth, representing 82.5% of the samples. The most frequently isolated bacteria were Bacillus spp., Corynebacterium spp., Escherichia coli, Listeria spp., Staphylococcus spp., and Streptococcus spp. From the tested antibiotics, amicacin and gentamicin were 100% effective for Bacillus spp. and E. Coli. Ceftiofur was effective for all isolates except for Rodococcus equi. Streptococcus spp. were susceptible to ampicillin and erythromycin and Staphylococcus spp. were sensitive to gentamycin. The use of Kilol-L® reduced the number of Colony Forming Units (CFU/mL) from ejaculate without damaging semen quality. From the tested antibiotics, ceftiofur and gentamicin were more effective against the isolated bacterial strains; thus the use of these antibiotics in the ram semen extender is an alternative to control bacterial growth.

OBJETIVO: avaliar os efeitos de diferentes tempos de pré-condicionamento isquêmico(PCI) intestinal sobre a translocação bacteriana (TB). MÉTODOS: Trinta ratos Wistar pesando 280±27g foram alocados em cinco grupos. No grupo IR (n=6), foi realizada laparotomia e a artéria mesentérica superior foi ocluída por microclampe atraumático por 30 minutos. Nos quatro grupos com pré-condicionamento (n=6 cada), antes dos 30 minutos de isquemia-reperfusão (I/R) os ratos foram submetidos a PCI de dois, cinco, dez e 15 minutos e, em seguida, ao mesmo tempo de reperfusão. Vinte e quatro horas após, para avaliar se os tempos de pré-condicionamento influenciam o aparecimento de translocação bacteriana, amostras de linfonodos mesentéricos, fígado e baço foram coletadas em condições estéreis, para quantificação de unidades formadoras de colônias bacterianas por grama de tecido (UFC/g). Sangue foi coletado para dosagem de citocinas. RESULTADOS: No grupo I/R, o total de UFC/g em linfonodos mesentéricos, baço, fígado, bem como, a dosagem sérica de TNF-a, IL-1b e IL-6 foram significativamente maiores do que nos demais grupos (p<0,05). Pré-condicionamento de 15 minutos atenuou significativamente a BT e as citocinas séricas, comparando com os outros tempos de pré-condicionamento (p<0,05). CONCLUSÃO: Nossos dados sugerem o pré-condicionamento como fator-chave para reduzir translocação bacteriana em I/R intestinal. Numa escala de dois a 15 minutos, o melhor tempo de pré-condicionamento isquêmico para a atenuação da translocação bacteriana foi 15 minutos.

OBJECTIVE: To evaluate the effects of different times of ischemic preconditioning (IPC) on intestinal bacterial translocation (BT). METHODS: Thirty Wistar rats weighing 280 ± 27g were divided into five groups. In the IR group (n = 6), laparotomy was performed and the superior mesenteric artery was occluded by an atraumatic microclamp for 30 minutes. In the four preconditioning groups (n = 6 each) before the 30 minutes of ischemia-reperfusion (I/R) rats underwent IPC for two, five, ten and 15 minutes, followed by the same time of reperfusion. In order to assess whether the time of preconditioning influenced the onset of bacterial translocation, samples of mesenteric lymph nodes, liver and spleen were collected in sterile conditions twenty-four hours after the procedures for quantification of bacterial colony forming units per gram of tissue (CFU/g). Blood was collected for measurement of cytokines. RESULTS: In the I/R group, the total CFU/g in mesenteric lymph nodes, spleen, liver, as well as the serum TNF-á, IL-1â and IL-6 were significantly higher than in the other groups (p <0.05). Preconditioning for 15 minutes significantly attenuated BT and serum cytokines when compared to other periods of preconditioning (p <0.05). CONCLUSION: Our data suggest preconditioning as a key factor to reduce bacterial translocation in intestinal I/R. On a scale of two to 15 minutes, the best time of ischemic preconditioning for the attenuation of bacterial translocation was 15 minutes.

Abstract: Modern agricultural production requires high amounts of agrochemical derivatives of petroleum. Their production and use contaminate the atmosphere, generating damage to health of living beings. An alternative to the exclusive use of agrochemicals, while maintaining a profitable agricultural production and aiming for sustainable management, is the application of nitrogen fixing microorganisms. In this way, this alternative reduces costs (economic and environmental) without affecting crop productivity. Our objective was to generate a technology with potentially useful native rhizobia strains as biofertilizers, applied to agricultural crops in localities of the state of Chihuahua. In 11 agricultural soil samples, bacterial populations were evaluated, finding levels from 1 × 102 a 6.6 × 103 training units of colonies (UFC g-1); showing the negative effect of chemical fertilizers on microbial soil populations. Some strains showed very low survival capacity in vitro. We obtained a collection of 24 strains isolated from soil and 7 strains isolated from root nodules. The 31 isolates were identified by 16S rDNA sequencing, mainly Rhizobium and Ensifer were found. Growth in culture medium was evaluated under different physiological conditions (pH 4.0, 5.5, 6.8 and 8.0; temperature of 32 and 42 ºC, and NaCl concentration of 0.01, 0.51 and 0.85 mol L-1). Strains with capacity to grow under adverse conditions were obtained. This capacity suggests physiological flexibility and adaptation to environmental conditions. The difference in effectiveness observed for inoculated strains on leguminous crops visibly shows the necessity of multistrain inoculants as an alternative for sustainable agriculture.

Resumen: La producción agrícola moderna requiere gran cantidad de agroquímicos derivados del petróleo, por lo que su producción y uso contaminan el ambiente, además de generar daños en la salud de los seres vivos. Una alternativa para mantener un nivel rentable de producción, con un menor uso de agroquímicos, y enfocando la agricultura hacia un manejo sustentable, es la aplicación de microorganismos fijadores de nitrógeno. De esta forma, se busca implementar alternativas que permitan reducir los costos (económicos y ambientales) sin afectar la productividad de los cultivos. Este trabajo se enfocó a generar una tecnología sustentable a base de cepas nativas de rhizobia, potencialmente útiles como biofertilizantes, aplicable a cultivos agrícolas en localidades del estado de Chihuahua. En 11 muestras de suelos con actividad agrícola se evaluó la densidad de poblaciones bacterianas, a niveles de 1 × 102 a 6.6 × 103 unidades formadoras de colonias (UFC g-1), mostrándose el efecto negativo de la aplicación de fertilizante químico a nivel de las poblaciones microbianas del suelo. Algunas cepas presentaron una baja tasa de supervivencia in vitro, se obtuvo una colección de 24 cepas provenientes de suelo y 7 de nódulos radiculares. Las 31 cepas se identificaron mediante el análisis de secuencias del gen 16S rDNA, encontrando principalmente Rhizobium y Ensifer. Se evaluó el crecimiento de las cepas en medio de cultivo bajo diferentes condiciones fisiológicas (pH de 4.0, 5.5, 6.8 y 8.0; temperatura de 32 y 42 ºC; NaCl de 0.01, 0.51 y 0.85 moles L-1). Se aislaron cepas con capacidad de crecimiento en condiciones que se consideran adversas y que sugieren una mayor flexibilidad fisiológica y capacidad de adaptación a las condiciones ambientales (pH, temperatura, osmolaridad, fuente de C y energía). La diferencia en efectividad de las cepas inoculadas en leguminosas hace evidente la necesidad de diseñar un inoculante multicepa como parte de una alternativa encaminada hacia la agricultura sustentable.

La calidad del aire de los ambientes internos puede estar influenciada por distintas partículas suspendidas en la atmósfera (polvo, polen, bacterias, hongos, virus) que pueden causar daños a documentos y presentar reacciones alérgicas en personas que trabajan con éstos. Con este trabajo, se identificaron hasta género los microorganismos presentes en el ambiente del archivo central, Universidad Pedagógica y Tecnológica de Colombia, que podrían causar alergias respiratorias en los trabajadores de esta área. Para las muestras de ambiente se empleó el método de sedimentación en placa utilizando agar papa dextrosa y se midieron temperatura y humedad relativa durante cada muestreo. Asimismo, se aplicó una encuesta a los trabajadores con el fin de conocer sintomatología respiratoria sugestiva que pudieran presentar por el manejo de documentos y se tomaron muestras de fosas nasales a algunos de ellos. Se aislaron del ambiente 14 géneros entre hongos, levaduras y bacterias, y dos categorías de microorganismos no identificadas. Los géneros fúngicos predominantes fueron Mucor spp., y Penicillium spp., con un 36,6% y 27,5%, respectivamente, del total de colonias aisladas. Las formas levaduriformes principalmente del género Rhodotorula, y bacterianas con predominio de formas cocoides fueron aisladas en menor proporción. No se encontró correlación estadísticamente significativa entre el promedio de unidades formadoras de colonia con temperatura y humedad relativa del ambiente. Además, en las muestras de fosas nasales sólo se encontró microbiota normal de nariz, lo cual indica que los síntomas respiratorios sugestivos que presentan los trabajadores no estuvieron influenciados directamente por la presencia de esporas de hongos en el ambiente del archivo central.

Air quality of indoor environments can be influenced by different particles suspended in the atmosphere (dust, pollen, bacteria, fungi, and virus) that could cause damage to documents and induce allergic reactions in people working with these documents. In this work, we identified until genera the microorganisms present in the environment of the central archive of Universidad Pedagógica y Tecnológica de Colombia; specifically those that could cause respiratory allergies to personnel of this area. For the environment samples, we used the open Petri dish sedimentation method using potato dextrose agar, and measured temperature and relative humidity during each sampling. Also, a survey was taken of the workers to record respiratory symptoms that could arise from handling documents. Samples were taken from the nostrils of some of these workers. Fourteen genera among fungi, yeasts, and bacteria, and two non identified categories were isolated from the environment. The predominant fungal genera were Mucor spp. and Penicillium spp. with 36.6% and 27.5% of the total of isolated colonies, respectively. Yeast, mainly Rhodotorula genera, and bacteria with prevalence coccus forms were isolated in smaller proportions. There was not statistically significant correlation among the average of colony forming units and the temperature and relative humidity in the environment. In addition, nostril samples yielded only normal microbiota of the nose, indicating that suggestive respiratory symptoms workers presented are not directly influenced by the presence of fungal spores in the environment at the central archive.

Las asas calibradas para la cuantificación de unidades formadoras de colonias bacterianas transfieren un volumen de muestra “exactamente conocido” y han sido herramientas de gran importancia para laboratorios de control de calidad, investigación y clínico. Las asas que se comercializan en el país son importadas y mayoritariamente de aleaciones de níquel-cromo. Es por ello que surge la necesidad de buscar internamente alternativas de bajo costo. En este trabajo se propuso la fabricación de asas con alambres comerciales de níquel-cromo equivalentes a las asas de platino y níquel-cromo comerciales, a un costo inferior. Las asas fueron comparadas según su desempeño y apariencia. Todas las asas fueron calibradas empleando dos métodos (gravimétrico y colorimétrico) con ángulos de carga de 45º y 90°. Se empleó un diseño experimental con arreglo factorial de tratamiento 2³ (método de calibración-tipo de asa-ángulo de carga, con 4 repeticiones). Se realizaron análisis de varianza de 672 datos, comparación de medias (prueba de Tukey) y se calcularon los intervalos de confianza de Bonferroni de las desviaciones estándar. Se demostró que las asas artesanales emulan a las comerciales, representando una alternativa nacional de bajo costo para la obtención de estos instrumentos.

Calibrated metallic loops for the quantification of bacterial colony forming units transfer an “exactly known” sample volume and have been extremely important tools for quality control, research and clinical laboratories. The loops marketed in our country are imported and mostly made of nickel-chrome alloy. This has created the need for searching for low cost national alternatives. In this work we propose the manufacture of these loops with commercial nickel-chrome wire equivalent to the commercial platinum and nickel-chrome loops, at lower costs. The loops were comparable in performance and appearance. All the loops were calibrated using two methods (gravimetric and colorimetric) with 45º and 90º charge angles. An experimental design with factorial treatment arrangement 2³ (calibration method-loop type-charge angle with 4 repetitions) was used. A 672 data variance analysis and comparison of means (Tukey’s test) were carried out, and Bonferroni’s confidence intervals of the standard deviations were calculated. It was demonstrated that the artisan loops emulated the commercial ones, representing a low cost national alternative for obtaining these instruments.

Bacilos entomopatogênicos são bactérias observadas principalmente no solo, consideradas importantes agentes no controle biológico de doenças e pragas da agricultura. No entanto, existem poucos estudos que relatam a influência das práticas agrícolas nas populações de Bacillus spp. Essa pesquisa objetivou avaliar a freqüência de bactérias entomopatogênicas pertencentes ao gênero Bacillus obtidas de amostras de solo coletadas no ano agrícola de 2006/2007 de diferentes sistemas de cultivo de arroz irrigado da EEA-IRGA, Cachoeirinha (RS). Foram analisadas 36 amostras de solos, oriundas de três sistemas de plantio de arroz irrigado, pré-germinado (SPG), convencional (SPC), plantio direto (SPD) e de uma área sem plantio de arroz (C). Para tanto, um grama de solo foi diluído, pasteurizado e inoculado em Ágar Nutriente (AN), incubado a 30 °C, por 24 horas. Todas as unidades formadoras de colônias bacterianas (UFC) foram repicadas em meios seletivos e as espécies, B. thuringiensis, B. sphaericus e B. cereus, foram identificadas por microscopia de contraste de fase. Os resultados revelaram que não houve diferença significativa entre os sistemas de plantio analisados. Por outro lado, a frequência de Bacillus spp. variou entre as diferentes fases do plantio de arroz nos períodos amostrados. A irrigação foi o principal fator que contribuiu para a variação da frequência dos Bacillus em sistemas de plantio de arroz irrigado da EEA-IRGA.

Entomopathogenic Bacillus are bacteria found mainly in the soil and are considered important agents in biological control of agricultural diseases and pests. However, there are fen studies describing the influence that different agricultural practices have on Bacillus spp. populations. This study proposes to determine the occurrence frequency of entomopathogenic bacteria from Bacillus genus in soil samples. These were collected during the agricultural year 2006/07 from different irrigated rice cultivation systems used in the EEA-IRGA plantations in Cachoerinha, State of Rio Grande do Sul, Brazil. We analyzed 36 soil samples taken from three irrigated rice plantation systems; (i) Pre-germinated (SPG); (ii) Conventional (SPC); and (iii) Direct plantation (SPD) and a fourth sample from a non-planted area (C). In each test one gram of soil was diluted, pasteurized and inoculated in Nutrient Agar (NA) and incubated for 24 hours at 30°C. All the bacteria colony-forming units (CFU) were transplanted to selective mediums and the B. thuringiensis, B. sphaericus and B. cereus species were identified using a phase contrast microscope. No significant differences in the occurrence frequencies were found in the soil samples of all plantation systems analyzed. On the other hand, the Bacillus spp frequency varied in the sampled period during the different growing phases of the irrigated rice in the EEA-IRGA plantations evaluated. Irrigation was the main factor contributing to variation of the Bacillus in the plantations.

Uma célula eletroquímica de camada delgada foi utilizada e desenvolvida para a desinfecção de água contaminada artificialmente com Staphylococcus aureus. A eletrólise foi executada com uma fonte de corrente direta utilizando 75 mA cm-2 (3 A) ou 25 mA cm-2 (1 A). Um anodo dimensionalmente estável (DSA) de titânio revestido com uma camada do óxido de 70%TiO2 e 30%RuO2 (w/w) e distanciado por 3 milímetros de um catodo de aço inoxidável 304 foi utilizado para gerar uma camada delgada de suspensão bacteriana passando pela célula de camada delgada. As suspensões utilizadas eram feitas apenas com Na2SO4 0,08 M e livre de íons cloretos de forma a inativar as células bacterianas no tratamento eletroquímico sem a geração de cloro, este pode promover a formação dos trialometanos (THM). As taxas de fluxo em recirculação foram 200 ou 500 L h-1. A inativação do S. aureus aumentou com o tempo de eletrólise e a uma taxa de fluxo menor. Assim, a inativação de 100% para o S. aureus foi observada após 30 min a 5,6 V e 75 mA cm-2. Em 500 L h-1 e 75 mA cm-2 a inativação decresceu em três logs de unidades formadoras de colônias por mL após 60 min. O tratamento eletroquímico utilizando uma camada delgada promove a desinfecção completa de S. aureus sem a necessidade de adicionar substâncias oxidantes ou a geração de cloro.

A thin layer electrochemical cell was tested and developed for disinfection treatment of water artificially contaminated with Staphylococcus aureus. Electrolysis was performed with a low-voltage DC power source applying current densities of 75 mA cm-2(3 A) or 25 mA cm-2 (1 A). A dimensionally stable anode (DSA) of titanium coated with an oxide layer of 70%TiO2 plus 30%RuO2 (w/w) and a 3 mm from a stainless-steel 304 cathode was used in the thin layer cell. The experiments were carried out using a bacteria suspension containing 0.08 M sodium sulphate with chloridefree to determine the bacterial inactivation efficacy of the thin layer cell without the generation of chlorine. The chlorine can promote the formation of trihalomethanes (THM) that are carcinogenic. S. aureus inactivation increased with electrolysis time and lower flow rate. The flow rates used were 200 or 500 L h-1. At 500 L h-1 and 75 mA cm -2 the inactivation after 60 min was about three logs of decreasing for colony forming units by mL. However, 100% inactivation for S. aureus was observed at 5.6 V and 75 mA cm-2 after 30 min. Thus, significant disinfection levels can be achieved without adding oxidant substances or generation of chlorine in the water.

RESUMO O setor avícola brasileiro atingiu, graças ao avanço tecnológico e à competência dos profissionais ligados ao setor, o posto de maior exportador e segundo maior produtor mundial de carne de frango. Estes métodos incluem a questão de contaminação do ambiente por micro-organismos patogênicos que podem trazer perdas produtivas na cadeia avícola como um todo. O objetivo do presente trabalho foi avaliar as condições microbiológicas de um incubatório do Estado de São Paulo. A metodologia empregada foi a da técnica da placa de sedimentação com meios de cultura específicos para o crescimento de bactérias e de fungos. Foram realizados 30 monitoramentos, expondo-se as placas de Petri com dois meios de culturas diferentes, ágar Mac Conkey e ágar Sabouraud dextrose. Observamos que os índices de contaminação fúngica e bacteriana não foram elevados nos locais onde as placas foram expostas, exceto na máquina de vacinação onde o número de enterobactérias foi 52,7 unidades formadoras de colônias (UFC). Podemos concluir que o método de contagem de colônias fúngicas e bacterianas pode ser uma maneira simples de monitorar a eficiência sanitária do incubatório.

ABSTRACT Due to technological advances and professional commitment, the Brazilian poultry industry has become the main exporter and second major producer of chicken meat in the world. These methods involve the issue of environmental contamination by pathogenic microorganisms which can result in productive losses for the poultry industry as a whole. The objective of the present work was to evaluate the microbiological conditions of a hatching house in the state of São Paulo, Brazil. The technique of plate sedimentation was the methodology used, with two culture mediums for growing specific bacteria and fungi. Thirty monitorings were carried out, with two different culture mediums, Mac Conkey Agar and Sabouraud Dextrose Agar. It was observed that the indices of fungus and bacterial contamination were not elevated in the places where the plates had been exposed, except in the vaccination machine where the number of enterobacteria was 52.7 colony forming units (CFU). The results indicate that the method of counting of fungal and bacterial colonies can be a simple way to monitor the sanitary efficiency of the hatching house.

Objective: To evalúate the presence of supragingival bacterial plaque and Porphyromona gingivalis before and after the implementation of an educational program for oral hygiene. Methods: 30 scholars were enrolled for 3 months, in order to strenghten their oral hygiene technique and obtain a gingival sulcus bacterial plaque sample monthly. Results: Porphyromona gingivalis was present in 100% of cases. After 30 days of intervention, oral hygiene reduction in O'Leary rate was 21.15%) and bacteria colony forming units in 21.51%o. After 60 days, O'Leary Índex declined in 29.45%> and bacteria colony forming units in 16.12%o. Conclusions: The implementation of an oral hygiene program has a direct impact in the composition of the gingival sulcus bacterial plaque and the decrease of Porphyromona gingivalis colony forming units, mainly at 30 days intervention

Objetivo: Evaluar antes y después de la aplicación de un programa de intervención de higiene bucal la presencia de placa bacteriana supragingival y de Porphyromona gingivalis. Pacientes y Método: A 30 escolares se les realizó mensualmente un muestreo de placa bacteria del surco gingival, índice de OEeary y reforzamiento de la técnica de higiene bucal; durante tres meses. Resultados: La bacteria Porphyromona gingivalis estuvo presente en el 100% de los casos durante todo el período de intervención. A los 30 días de la intervención de higiene bucal la disminución del índice de OEeary fue de un 21,15% y las unidades formadoras de colonias bacterianas en un 21,51%o. Luego a los 60 días el índice de OEeary disminuyó en un 29,45%o y las unidades formadoras de colonias en un 16,12%o. Conclusión: Se concluye que la implementación de un programa de intervención de higiene bucal influye directamente en la composición de la placa bacteriana del surco gingival disminuyendo el número de unidades formadoras de colonias de Porphyromona gingivalis en la medida que la higiene bucal mejora. La mayor disminución fue a los 30 días

Objetivou-se avaliar in vitro a eliminação do Enterococcus faecalis em pré-molares inferiores humanos após o preparo químico-mecânico seguido ou não de curativo de hidróxido de cálcio. Após 60 dias de contaminação com E. faecalis os canais radiculares foram preparados utilizando-se a técnica coroa-ápice associada à irrigação com clorexidina em gel a 2%. Posteriormente os espécimes foram divididos em dois grupos experimentais, tratados em uma ou duas sessões, e dois grupos controles. O grupo tratado em duas sessões recebeu medicação intracanal de hidróxido de cálcio por 14 dias (CalenTM) e o grupo de sessão única não recebeu medicação. Nos dois grupos controles, após o preparo químico-mecânico com clorexidina em gel a 2% ou água destilada, os canais foram preenchidos com BHI. Amostras microbiológicas foram coletadas dos canais radiculares e contadas por meio de unidades formadoras de colônia em cada fase do tratamento utilizando-se ponta de papel dentro da luz do canal. Os dados foram analisados estatisticamente pelo teste de Kruskal-Wallis. As colônias bacterianas residuais foram então mensuradas. A utilização da clorexidina em gel a 2% sem emprego da medicação intracanal reduziu em 100% a contaminação por E. faecalis. O grupo que recebeu a medicação intracanal de hidróxido de cálcio por 14 dias permitiu o crescimento de pequeno número de bactérias entre as sessões, mas sem diferença estatística entre os grupos.

The purpose was to assess the elimination of Enterococcus faecalis in vitro in human mandibular premolars after chemomechanical preparation with or without the use of a calcium hydroxide dressing. After 60 days of contamination with E. faecalis, the root canals were prepared using the Crown-Down technique combined with 2% chlorhexidine gel irrigation. Then, the specimens were divided into two experimental groups, treated in a single visit or in multiple visits, and two control groups. The multiple-visit group received a dressing with calcium hydroxide for 14 days (CalenTM) and the single-visit group did not receive any medication. In the two control groups, the canals were filled with BHI after chemomechanical preparation with 2% chlorhexidine gel or distilled water. Microbial samples were taken from the root canals for colony forming unit count for each phase of the treatment using sterile paper points inside the root canal lumen. Data were ranked and analyzed by the Kruskal-Wallis statistical test. The residual microbial colonies were then assessed. The results showed that chemomechanical preparation using 2% chlorhexidine gel with no intra-canal dressing reduced by 100% the E. faecalis contamination of the root canal lumen. The calcium-hydroxide group that received the 14-day intra-canal dressing allowed a small number of bacteria to grow between visits, but without statistical differences between groups.

Introducción. Un recuento superior a 10(5) unidades formadoras de colonias por ml de aspirado duodenal se considera la "prueba de referencia" para el diagnóstico de proliferación bacteriana intestinal, a pesar de su caracter invasivo. La prueba de hidrógeno en el aliento, con lactulosa, se aplica como alternativa diagnóstica no invasiva, pero el fundamento para el empleo de lactulosa carece de solidez. Objetivos. Aportar evidencia experimental para sustentar el uso de lactulosa en la prueba de hidrógeno y validarla frente al cultivo de aspirado duodenal. Materiales y métodos. Para fundamentar el uso de lactulosa se comparó la cinética de la lactasa intestinal frente a lactulosa con su cinética frente a la lactosa. Con el fin de validar la prueba de hidrógeno, ésta se aplicó a 47 niños afectados por trastornos gastrointestinales y los resultados se compararon con los de la prueba de referencia. Mediante una tabla de contingencia se estimó la validez y con el índice kappa, la concordancia. Resultados. La cinética mostró que la lactasa es 240 veces menos eficiente que la lactulosa. La sensibilidad de la prueba de hidrógeno fue de 85,7% (82,0%-89,4%), la especificidad de 90,9% (89,3%-92,5%), el valor diagnóstico positivo de 80% (76,5%-83,5%) y el valor diagnóstico negativo de 93,8% (92,1%-95,4%). El índice kappa de 0,785 (0,54-0,95) indicó una importante concordancia entre las pruebas diagnósticas. Conclusiones. Se aporta evidencia experimental para sustentar el uso de la lactulosa en la prueba de hidrógeno y se valida ésta frente al patrón de referencia como prueba tamiz para diagnosticar la proliferación bacteriana intestinal.

Introduction.The standard method for diagnosis of small intestinal bacterial overgrowth is a duodenal aspirate that produces a coliform count greater than 105 colonic forming units/ml. Because this is an invasive procedure, the lactulose breath hydrogen test is considered as a non-invasive alternative. Better experimental support is required, however, for the routine use of lactulose in diagnosis. Objective. Experimental evidence is provided to support the use of lactulose in the breath hydrogen test. Validation of the test is accomplished by comparison to the duodenal aspirate culture. Materials and methods. A rational basis for the use of lactulose was established by a comparison of the kinetics of lactulose and lactose on intestinal lactase. For validation, the hydrogen test was applied to 47 children suffering from gastrointestinal disorders, and the results compared with aspirate culture counts. The validity of the hydrogen test was assessed by a contingency table and the degree of agreement established by the kappa index. Results. The kinetics data showed that lactase is 240 times less efficient in presence of lactulose than it is in presence of lactose. The sensitivity of the breath hydrogen test was 85.7% (82.0-89.4%), its specificity 90.9% (89.3-92.5%), the predictive positive value 80.0% (76.5-83.5%) and the predictive negative value 93.8% (92.1-95.4%); the kappa index=0.785 (0.54-0.95) showed excellent agreement between the two diagnostic tests. Conclusion. The results provided experimental support for the use of lactulose in the breath hydrogen test, and it was validated as screening test in the diagnosis of small intestinal bacterial overgrowth.

OBJETIVO: Avaliar, por meio de estudo bacteriológico in vitro, o efeito de dois tipos de laser de baixa energia (LBE) sobre diferentes populações bacterianas habitualmente presentes em feridas pós-traumáticas. MÉTODOS: Foram colhidos swabs diretamente do sítio de infecção de pacientes internados com osteomielite pós-traumática crônica. As bactérias isoladas foram Acinetobacter baumanii complex, Escherichia coli, Haemophilus influenzae, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, Salmonela sp, Serratia sp e Staphylococcus aureus. O material coletado foi semeado em meio ágar-sangue, através de alça estéril, utilizando-se 30 placas de Petri para cada germe. Foram utilizados dois aparelhos de LBE: Ibramed Laser Pulse #01189, com 15W/904nm por 200 segundos, e Phisiolux dual Bioset #9909001, com 20W/904nm por 230 segundos. Nos grupos I (n = 10) e II (n = 10), as bactérias sofreram irradiação pelo laser. O grupo III (n = 10) serviu de controle, não sendo irradiado. As bactérias dos grupos I e II foram irradiadas em câmara de fluxo laminar, previamente esterilizada por raio ultravioleta. O laser foi administrado de forma direta, central e perpendicularmente à superfície de cultivo das bactérias, com distância-padrão de 1cm, através de orifício confeccionado na tampa das placas. O crescimento bacteriano foi analisado após 12 e 24 horas da irradiação. Os resultados foram processados estatisticamente, utilizando-se o teste não-paramétrico de Kruskall-Wallis, com nível de significância p < 5%. RESULTADOS: Observou-se comportamento similar entre as populações bacterianas nos três grupos experimentais após 12 e 24 horas da irradiação com os dois tipos de LBE, não havendo diferença estatisticamente significante no crescimento bacteriano entre os grupos I e II e entre estes e o grupo III (controle). CONCLUSÃO: O efeito do LBE, nas condições estudadas, mostrou-se inócuo quanto ao aumento do número de unidades formadoras de colônias bacterianas, nas doses utilizadas nesta pesquisa, como medida adjuvante no processo de cicatrização de feridas, mesmo na vigência de contaminação pelas bactérias avaliadas.

OBJECTIVE: To perform an in vitro bacteriologic study to evaluate the effect of two types of low level laser (LLL) on different bacterial populations usually present in post-traumatic wounds. METHODS: Swabs were prepared directly at the infection site of patients hospitalized with chronic post-traumatic osteomyelitis. Isolated bacteria were Acinetobacter baumanii complex, Escherichia coli, Haemophilus influenzae, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, Salmonela sp, Serratia sp, and Staphylococcus aureus. The material collected was seeded in agar-blood medium with a sterile loop, using 30 Petri dishes for each germ. Two LLL devices were used: Ibramed Laser Pulse #01189, with 15W/904nm for 200 seconds, and Phisiolux dual Bioset #9909001, with 20W/904nm for 230 seconds. In groups I (n = 10) and II (n = 10), bacteria were irradiated with laser. Group III (n = 10) was the control group and was not irradiated. Bacteria in groups I and II were submitted to radiation in a laminar flow chamber that was previously sterilized with UV rays, and the laser was directly, centrally, and perpendicularly applied to the bacteria cultivation surface, from a standard distance of one centimeter, through an orifice made in the lid of the dishes. Bacterial growth was analyzed 12 and 24 hours after the irradiation. Results were statistically processed using the non-parametric test of Kruskall-Wallis, with a significance level p < 5%. RESULTS: A similar behavior was seen in the bacterial population of the three groups studied after 12 and 24 hours of irradiation with the two types of LLL, and there was no statistically significant difference in the bacterial growth between groups I and II and between these two groups and group III (control). CONCLUSION: In the conditions of this study, the effect of LLL showed to be innocuous for the increase in the number of units forming bacterial colonies, in the doses used in this study, as an adjuvant for the wound healing process, even under contamination by the bacteria being evaluated.

OBJETIVO: Avaliar modelos de coleta de material gástrico de ratos da linhagem Wistar, com e sem o uso de inibidores de bomba de próton (IBPs). MÉTODOS: 24 ratos foram submetidos a tratamento com omeprazol intraperitoneal e 12 outros ratos receberam tratamento semelhante com solução salina a 0,9%. Os animais foram submetidos a coleta de amostras de material gástrico, após retirada do estômago, utilizando-se de biópsias, aspirados ou swabs. Os materiais obtidos foram processados bacteriologicamente para identificação de espécimes quanto ao gênero. Os valores são descritos em logaritmo natural das unidades formadoras de colônias por mL [Ln(UFC/mL)]. Utilizou-se os testes não-paramétricos de Kruskal-Wallis e Mann-Whitney, considerando-se p<0,05 como estatisticamente significativo. RESULTADOS: Não se observou diferença significativa da quantidade de Ln(UFC/mL) entre os três métodos de coleta, independente do uso de omeprazol. Também não se observou diferença significativa de Ln(UFC/mL) ao comparar-se os métodos individualmente entre si nas condições de uso de omeprazol ou placebo. Houve aumento significativo da variedade de gêneros de bactérias com o uso de IBP, nos 3 métodos de coleta, sendo isto mais perceptível na biópsia e swab. CONCLUSÃO: Não houve diferença entre os três métodos de coleta de amostras bacterianas de estômago de ratos, tanto em uso de placebo quanto em uso de omeprazol. Nota-se uma mudança evidente da microflora bacteriana nos animais em uso de IBPs, sendo melhor identificado pelos métodos de swab e biópsia.

PURPOSE: To evaluate models of gastric material collection from Wistar rats with and without using proton pump inhibitors(PPIs). METHODS: Twenty-four rats underwent intraperitoneal omeprazol treatment, and other 12 received similar treatment with 0.9% saline. All animals underwent collection of gastric material samples, after stomach removal, by either biopsies, or aspirates, or swabs. Samples were bacteriologically processed in order to identify species and strains. Values are described as natural logarithm of colony former units per mL [Ln(CFU/mL)]. Kruskal-Wallis and Mann-Whitney non-parametric tests were used, and p<0.05 was set as statistically significant. RESULTS: Significant difference was not seen for Ln (UFC/mL) values among the three methods of collection irrespective of using or not omeprazol. Also, significant difference was not seen in Ln (UFC/mL) values when comparing a method with each others, either using omeprazol or placebo. A significant increase of bacteria strains occurred when PPI was used, and this was seen on the three ways of collection, mainly in biopsy and swab. CONCLUSION: No difference occurred among the three methods of collecting bacteria samples from stomachs of rats, either when using placebo or omeprazol. A remarkable change is seen on animals bacterial microflora when PPIs are used, and bacteria are better identified when swab and biopsy are used.

O objetivo deste estudo foi avaliar a capacidade do ozônio associado a três diferentes soluções usadas em um sistema de limpeza ultra-sônica em inativar Staphylococcus aureus. Cento e vinte mL de suspensão com S. aureus foram misturadas em 6 L das soluções experimentais (água destilada esterilizada, vinagre de maça, e água destilada esterilizada + Endozime AWpluz) utilizadas no sistema de limpeza ultra-sônica. O ozônio foi produzido por descarga elétrica através de uma corrente de oxigênio com valor de 7g/h de ozônio (1,2%) dentro das suspensões microbianas. Um total de 10 mL de cada solução experimental foram coletados e realizadas cinco diluições em 9 mL de BHI e incubadas a 37°C por 48 h. O crescimento bacteriano foi avaliado pela turbidade do meio de cultura. Ao mesmo tempo, 1 mL das amostras bacterianas foram coletadas e inoculadas em placas contendo BHIA. Após o período de incubação a 37ºC por 48 h, realizou-se a contagem de unidades formadoras de colônias (ufc/mL). No teste de diluição em tubos com BHI e placas com BHIA (ufc/mL), quando o ozônio foi empregado, o crescimento bacteriano não foi observado em nenhuma das soluções experimentais. Nas condições deste estudo, a aplicação do ozônio nas soluções experimentais presentes no sistema de limpeza ultra-sônica mostrou atividade antibacteriana sobre S. aureus.

The aim of this study was to evaluate the antimicrobial potential of ozone applied to 3 different solutions in an ultrasonic cleaning system against Staphylococcus aureus. A total of 120 mL of S. aureus were mixed in 6 L of the experimental solutions (sterilie distilled water, vinegar and sterile distilled water + Endozime AWpluz) used in a ultrasonic cleaning system (UCS). Ozone was produced by an electric discharge through a current of oxygen and bubbling with flow rate at 7g/h ozone (1.2%) into the microbial suspensions. Ten mL of each experimental suspension were collected and 5 fold dilutions were made in 9 mL of BHI and incubated at 37°C for 48 h. Bacterial growth was evaluated by turbidity of the culture medium. At the same time, 1 mL of bacterial samples was collected and inoculated in BHIA plates. After incubation at 37°C for 48 h, the number of colony forming units (cfu) per mL on BHIA surface was counted. In dilution test in BHI tubes and in BHIA plates (cfu/mL), bacterial growth was not observed in any of the experimental solutions when ozone was added. Under the tested conditions, it may be concluded that the addition of ozone to a ultrasonic cleaning system containing different experimental solutions resulted in antibacterial activity against S. aureus.